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生物活性: BCIP (BCIP p-トルイジン塩; X-リン酸 p-トルイジン塩) は、アルカリホスファターゼ活性の比色検出のための発色基質です。

志賀毒素 (Stxs) は腸管出血性大腸菌 (EHEC) によって産生され、ヒトに感染を引き起こし、多くの場合致死的な結果をもたらします。アフリカミドリザルの腎臓に由来するベロ細胞株は、Stx の細胞毒性効果を測定するためのゴールドスタンダードです。Stx 受容体スフィンゴ糖脂質 (GSL) は世界的に使用されているにもかかわらず、その正確な構造と脂質ラフトにおけるそれらの集合についての知識は乏しいです。今回我々は、Vero-B4 細胞から調製され、脂質ラフト同等物として使用された Stx 受容体 GSL と界面活性剤耐性膜 (DRM) へのその分布の包括的な構造解析を紹介します。MS と組み合わせた TLC オーバーレイ検出を使用して、Stx1a、Stx2a、および Stx2e サブタイプの GSL 受容体としてグロボトリアオシルセラミド (Gb3Cer) およびグロボテトラオシルセラミド (Gb4Cer) を同定しました。Stx2e によって (Gb3Cer および Gb4Cer に加えて) 特異的に認識される珍しい Stx 受容体であるグロボペンタオシルセラミド (Gb5Cer、Galβ3GalNAcβ3Galα4Galβ4Glcβ1Cer) は、構造的に完全に特徴付けられました。Stx 受容体 GSL のリポフォームは、主にスフィンゴシン (d18:1) および C24:0/C24:1 または C16:0 脂肪酸で構成されるセラミド部分を保持していることが判明しました。さらに、DRM における脂質ラフトマーカーである SM およびコレステロールとの同時存在は、GSL と膜マイクロドメインとの関連を示唆しました。この研究は、Vero-B4 細胞の毒素媒介損傷に対する脂質ラフト関連 Stx 受容体の機能的影響をさらに調査するための基礎を提供します。