製品

椎間板変性の病因はほとんど理解されていませんが、このプロセスを防ぐ 1 つのアプローチは、アポトーシスを阻害することである可能性があります。現在の研究では、円板細胞の生存を高めることを目的として、髄核 (NP) 細胞におけるカルボキシメチル化キトサン (CMCS) の抗アポトーシス効果が調査されました。ラット NP 細胞を単離して in vitro で培養し、過酸化水素 (H2O2) を使用して NP 細胞アポトーシス モデルを構築しました。細胞生存率は、細胞計数キット 8 アッセイを使用して評価されました。アポトーシス細胞の割合はアネキシン V-フルオレセイン イソチオシアネート (FITC) とヨウ化プロピジウム (PI) の二重染色分析によって調査され、形態は Hoechst 33342 染色によって観察されました。NP 細胞のミトコンドリア膜電位は、ローダミン 123 蛍光染色によって評価されました。逆転写 (RT) 定量的ポリメラーゼ連鎖反応 (qPCR) を実行して、誘導性一酸化窒素合成酵素 (iNOS)、カスパーゼ-3、B 細胞リンパ腫 (Bcl )-2、II 型コラーゲン、およびアグリカンの mRNA レベルを測定しました。ウェスタンブロット分析を実行して、iNOS および Bcl-2 のタンパク質レベルを検出しました。アネキシン V‑FITC/PI および Hoechst 33342 染色の結果は、CMCS が用量依存的に NP 細胞のアポトーシスを防止できることを示しました。ローダミン 123 染色により、CMCS が H2O2 処理 NP 細胞におけるミトコンドリア膜電位の障害を軽減することが明らかになりました。RT-qPCR およびウェスタンブロット分析により、CMCS 処理 NP 細胞でカスパーゼ-3 の減少と Bcl-2 活性の増加が検出されました。CMCS はまた、H2O2 処理した NP 細胞における II 型コラーゲンとアグリカンの増殖と分泌を促進しました。CMCS は in vitro でのアポトーシス細胞死の防止に効果的であることが示されており、椎間板変性の制御におけるこの治療アプローチの潜在的な利点が実証されています。