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カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス (KSHV) の ORF45 タンパク質は、ガンマヘルペスウイルス特異的な前初期外皮タンパク質です。私たちのこれまでの研究では、KSHV 感染の初期段階と後期段階の両方でその重要な役割が明らかになりました。この研究では、モノクローナル抗体のパネルを使用して ORF45 のインタラクトームを調査しました。以前に同定された細胞外調節キナーゼ（ERK）およびp90リボソームS6キナーゼ（RSK）タンパク質に加えて、我々は、〜38 kDaおよび〜130 kDaの顕著なものを含む、他のいくつかの共精製タンパク質を発見した。質量分析により、38 kDa のタンパク質がウイルスの ORF33 であり、130 kDa のタンパク質が細胞の USP7 (ユビキチン特異的プロテアーゼ 7) であることが明らかになりました。われわれは、ORF33結合ドメインをORF45の高度に保存されたカルボキシル末端の19アミノ酸（aa）にマッピングし、USP7結合ドメインをORF45の中央領域にある報告されているコンセンサスモチーフにマッピングした。免疫蛍光染色を使用して、トランスフェクト条件下およびKSHV感染細胞の両方でORF45とORF33またはUSP7の共局在を観察しました。さらに、我々は、ORF33/USP7 の一部が核から細胞質へ ORF45 依存的に再局在化することに気づきました。我々は、ORF45がORF33タンパク質の蓄積の増加を引き起こし、ORF45のORF33結合ドメインまたはUSP7結合ドメインのいずれかが欠失すると、この蓄積が消失することを発見した。さらに、KSHV ゲノムにおける ORF45 の保存されたカルボキシル末端の欠失により、KSHV 感染細胞における ORF33 タンパク質のレベルが大幅に低下し、子孫ビリオンの産生が消失しました。まとめると、我々の結果は、ORF45 インタラクトームの新しい構成要素を明らかにするだけでなく、これらのタンパク質間の相互作用が KSHV の溶解性複製に重要であることも示しています。 カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス (KSHV) は、いくつかのヒトの癌の原因物質です。KSHV ORF45 は、KSHV の溶解複製に必要な多機能タンパク質ですが、ORF45 がその重要な機能を実行する正確な機構は不明です。私たちのこれまでの研究により、細胞内のすべてのORF45タンパク質が高分子量複合体として存在することが明らかになりました。したがって、我々は、溶解複製中の ORF45 の役割についての洞察を提供するために、ORF45 のインタラクトームを特徴付けることを試みました。モノクローナル抗体のパネルを使用して、KSHV 感染細胞における ORF45 インタラクトームを調査しました。私たちは、ORF45 の 2 つの新しい結合パートナー、ウイルスタンパク質 ORF33 と細胞ユビキチン特異的プロテアーゼ 7 (USP7) を同定しました。我々はさらに、ORF45とORF33の間の相互作用がKSHVウイルス粒子の効率的な産生に重要であることを実証し、この相互作用への標的干渉がKSHV溶解性複製を阻害する新規戦略となる可能性があることを示唆している。