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ベータ-D-2'-デオキシ-2'-フルオロ-2'-C-メチルシチジン (PSI-6130) は、Huh-7 レプリコン細胞における C 型肝炎ウイルス (HCV) RNA 合成の強力な特異的阻害剤です。HCV NS5B RNA ポリメラーゼを阻害するには、PSI-6130 を 5'-三リン酸型にリン酸化する必要があります。PSI-6130 のリン酸化と HCV NS5B の阻害を調査しました。組換えヒト 2'-デオキシシチジン キナーゼ (dCK) およびウリジン - シチジン キナーゼ 1 (UCK-1) による PSI-6130 のリン酸化を、共役分光光度反応を使用して測定しました。PSI-6130は、81μMのKmおよび0.007s-1のkcatを有する精製dCKの基質であることが示されたが、UCK-1の基質ではなかった。PSI-6130 一リン酸 (PSI-6130-MP) は、それぞれ組換えヒト UMP-CMP キナーゼおよびヌクレオシド二リン酸キナーゼによって二リン酸に、続いて三リン酸に効率的にリン酸化されました。野生型および変異型 (S282T) HCV NS5B RNA ポリメラーゼの阻害を研究しました。野生型酵素によるＰＳＩ－６１ ３０三リン酸（ＰＳＩ－６１３０－ＴＰ）の定常状態阻害定数（Ｋｉ）は４．３μＭであった。同様の結果が、2'-C-メチルアデノシン三リン酸(Ki=1.5μM)および2'-C-メチルシチジン三リン酸(Ki=1.6μM)でも得られた。2'-C-メチルアデノシンに対する耐性を与えることが知られているS282T変異を有するNS5Bは、野生型と同様にPSI-6130-TPによって効率的に阻害された。精製された NS5B RNA ポリメラーゼによって触媒される PSI-6130-MP の RNA への組み込みにより、連鎖停止が起こりました。