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セリン/スレオニン プロテイン ホスファターゼは、多くの病原性細菌において、リン酸化依存性シグナル伝達経路に関与し、これらの微生物の毒性と頻繁に関連する必須酵素として記載されています。マイコプラズマ シノビア ゲノムの検査により、プロテイン ホスファターゼ 2C (PP2C) サブファミリーの推定上のプロテイン ホスファターゼをコードする遺伝子 (prpC) の存在が明らかになりました。今回我々は、M. synoviae ホスファターゼ (PrpC) の完全な生化学的特徴付けと、この酵素の構造と機能の関係における金属イオンの特定の役割を報告します。PrpC アミノ酸配列分析により、PP2C ホスファターゼに保存されている二核金属中心に関与するすべての残基と推定上の 3 番目の金属イオン配位残基が PrpC に存在することが明らかになりました。PrpC は、Mn(2+) イオンに依存してリン基質を脱リン酸化できる単量体タンパク質です。熱安定性分析により、穏やかな温度での酵素の安定性と、この特性における Mn(2+) イオンの影響が実証されました。質量分析によると、3 つの金属イオンが PrpC に結合し、そのうちの 2 つは明らかに高い親和性定数を持っていることが示唆されました。推定上の3番目の金属配位残基であるAsp122およびArg164の変異分析により、これらの変異体はマンガンイオンの結合が弱いこと、および両方の変異がPrpCホスファターゼ活性に影響を与えることが明らかになった。これらの結果によると、PrpC はホロ型および Asp122 での安定性が向上した金属依存性プロテイン ホスファターゼ メンバーであり、おそらく触媒活性に不可欠な 3 番目の金属結合部位に関与していると考えられます。