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真核細胞には、数分間の DNA 複製にのみ十分な量の 4 つのデオキシリボヌクレオシド三リン酸 (dNTP) が微妙なバランスで微量に含まれています。単一の dNTP の欠乏と過剰の両方が、突然変異率の増加、DNA 修復の欠陥、またはミトコンドリア DNA の枯渇を引き起こす可能性があります。dNTP は通常、DNA ポリメラーゼによる特定の合成オリゴヌクレオチドへの放射性 dATP (または dATP のアッセイでは放射性 dTTP) の取り込みが未知の dNTP の濃度に比例する酵素アッセイによって定量されます。私たちは、一般的に使用されているクレノウ DNA ポリメラーゼが未知の dNTP を対応するリボヌクレオチドに置き換える可能性があり、場合によっては dNTP を大幅に過大評価する可能性があることを発見しました。次に、リボヌクレオチドの取り込みを回避する各 dNTP のアッセイ条件について説明します。dTTP および dATP アッセイの場合、クレノウ酵素と標識 dATP (または dTTP) の濃度を最小限に抑えるだけで十分です。dCTP と dGTP については、Klenow 酵素を Taq DNA ポリメラーゼまたは Thermo Sequenase に置き換える必要がありました。我々は、以前のいくつかの報告では、リボヌクレオチドの取り込みが dGTP と dCTP の値が高すぎる原因となった可能性があることを示唆しています。