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DNA 塩基への酸化的損傷は一般に、酸化プリン、特に 7,8-ジヒドロ-8-オキソグアニン (8-oxoG) および 7,8-ジヒドロ-8-オキソアデニン (8-oxoA) の形成をもたらします。前者は、既知の変異原性病変。8-oxoG は通常の塩基と比較して容易にさらなる酸化を受けやすいため、DNA 合成中の 8-oxoG の酸化型とは反対の塩基の挿入を in vitro で研究しました。単一の 8-oxoG 病変を含む合成テンプレートを、まずさまざまな 1 電子酸化剤または一重項酸素条件下で処理し、次にクレノウ フラグメント exo- (Kf exo-)、子ウシ胸腺 DNA ポリメラーゼ アルファ (pol アルファ) によって触媒されるプライマー伸長に供しました。 ) またはヒト DNA ポリメラーゼ ベータ (pol ベータ)。以前の報告と一致して、dAMP と dCMP は 3 つすべての DNA ポリメラーゼで 8-oxoG の反対側に選択的に挿入されます。興味深いことに、8-oxoG の酸化は、Kf exo- による病変の反対側に dAMP および dGMP 挿入を誘導し、修飾された塩基の部位で起こるプライマー伸長の一時的な阻害を伴うことが判明しました。さらに、この損傷は、pol αおよびpol βによるDNA合成中のブロックを構成します。8-オキソA修飾テンプレートオリゴヌクレオチドを用いた実験では、8-オキソAと8-オキソAの酸化型の両方がKf exo-によるdTMPの直接挿入を示す。IrCl62 による酸化前後の 8-oxoG 含有オリゴヌクレオチドの質量分析は、主に 8-oxoG 部位の酸化と一致し、主生成物としてグアニジノヒダントイン部分が形成されます。脱塩基部位の形成に関する証拠は得られなかった。これらの結果は、8-oxoG の酸化型、おそらくグアニジノヒダントインが、DNA 合成中に dNTP の誤読や誤挿入を引き起こす可能性があることを示しています。このようなプロセスが生体内で起こった場合、それは G→T および G→C 転換を引き起こす点変異原性損傷を表すでしょう。しかし、対応する酸化型の 8-oxoA は主に、Kf exo- による DNA 合成中に T の正しい挿入を示します。