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4-ニトロフェニル α-D-ガラクトピラノシド (PNP-α-D-Gal) は、α-ガラクトシダーゼ活性を検出するための 4-ニトロフェニル (pNP) グリコピラノシドの人工基質です。4-ニトロフェニル α-D-ガラクトピラノシドを基質として使用すると、放出された pNP の量が大幅に増加しました。

4-ニトロフェノール (pNP) -グリコピラノシドを擬似基質として使用すると、pH4.0 で 4-ニトロフェニル α-D-ガラクトピラノシドから遊離された pNP の量は、pH7 では非活性が検出されたのに対し、他の pNP-グリコピラノシドからの遊離量よりも大幅に高かった。 ）人工基質のグリコピラノシドは、4-ニトロフェニルα-D-ガラクトピラノシドからの遊離ガラクトース残基の収率が主にpH4.0、すなわち収量閾値が最も低くなるpHレベルで収率が高いことを示している。

α-D-ガラクトシダーゼの基質（α-D-ガラクトシダーゼ）。大腸菌ラクトースタンパク質キャリアに結合します。α-D-ガラクトースの培地。

酵母および真菌に対する抗菌剤の溶解活性を評価する迅速な方法が開発されました。このアッセイは、細胞内酵素であるマルターゼ (α-グルコシダーゼ) の放出に基づいています。放出されたマルターゼ活性は、p-ニトロフェニル-アルファ-D-グルコピラノシド (PNPG) からの p-ニトロフェノールの生成により比色分析的に測定されました。さまざまな抗菌化合物の溶解活性を、酵母細胞または糸状菌の発芽胞子に対して測定しました。Saccharomyces cerevisiae、Candida albicans、およびCryptococcus neoformansに対する溶解性抗酵母活性は、30℃で20分間のインキュベーション以内に検出できました。黒色アスペルギルスおよびボトリチス・シネレアの発芽胞子に対して、30℃で2時間インキュベートした後、溶解性抗真菌活性が現れました。酵母または真菌の全細胞は、30℃で 3 時間以内に検出可能な色の変化をもたらすのに十分な量の PNPG を加水分解しませんでした。このアッセイを使用して、酵素 (例: リチカーゼ)、抗生物質 (例: アンホテリシン B)、および抗生物質を産生する細菌株の溶解活性が検出されました。抗酵母アッセイは 96 ウェル マイクロタイター形式に適合しています。どちらのアッセイでも、溶解性の抗酵母および抗真菌活性を迅速かつ高感度かつ再現性よく検出できました。